典型案例一：離子色譜（其他CRO未完成的研究）

● 項目名稱

黑龍江省某大型藥企口服補液鹽散（Ⅲ）中亞硝酸鹽和草酸鹽的研究

● 項目難點

（1）樣品基質(zhì)中含有高濃度的氯離子等陰離子，基質(zhì)效應(yīng)嚴重，影響目標(biāo)離子檢測;

（2）亞硝酸鹽極不穩(wěn)定，在空氣中易氧化成硝酸鹽，導(dǎo)致樣品檢測及樣品加標(biāo)回收率低。

（3）亞硝酸根離子限度要求低。

● 解決途徑及效果

（1）保持樣品及對照溶液的密封性，縮短與空氣接觸時間。

（2）在不影響其他雜質(zhì)對儀器和色譜柱的損害的前提下，盡量增大稱樣量，確定合適的樣品濃度。

（3）選擇合適的樣品處理方式，在既不干擾亞硝酸根及草酸根的情況下盡可能的消除氯離子等陰離子帶來的影響，提高檢測的靈敏度。

（4）項目得到客戶認可，并繼續(xù)合作甲磺酸等項目

典型案例二：金屬離子殘留

● 項目名稱

山東某大型藥企甲鈷胺中氯化鈷殘留的分析方法研究

● 項目難點

（1）甲鈷胺中含有的鈷影響氯化鈷的檢測。

（2）甲鈷胺與氯化鈷的分離問題，殘留的甲鈷胺導(dǎo)致氯化鈷回收率增高。

（3）氯化鈷對照品與供試品中某種成分發(fā)生反應(yīng)，加標(biāo)回收率極低。

● 解決途徑

（1）采用檢測鈷元素的方法間接檢測氯化鈷雜質(zhì)。

（2）采用合適的溶劑，將甲鈷胺和氯化鈷分離開，得到待測雜質(zhì)的溶液。

（3）加入合適的試劑，抑制氯化鈷對照品與供試品的反應(yīng)，提高加標(biāo)回收率。

典型案例三：脂質(zhì)研究（其他CRO未完成的研究）

● 項目名稱

山東省某大型藥企動物源原料藥和注射液品種(多糖類)中的脂質(zhì)研究

天津市某大型藥企動物源原料藥和注射液品種中的脂質(zhì)研究

● 項目難點

（1）脂質(zhì)研究涉及脂肪酸、磷脂、甘油三酯和膽固醇，種類繁多，無具體參考方法。

（2）部分脂肪酸和甘油三酯在目標(biāo)峰附近存在干擾。

（3）脂質(zhì)易形成膠束，從而影響測定。

（4）該研究為發(fā)補研究，時間緊，且在其他CRO未完成。

（5）供試品的處理方式也是難點所在。

● 解決途徑及效果

（1）部分脂肪酸和甘油三酯在目標(biāo)峰附近存在干擾，因此實驗需要特殊處理系統(tǒng)和物料，以減小干擾。

（2）優(yōu)化樣品前處理流程，確定目標(biāo)質(zhì)荷比，提高檢測靈敏度。

（3）后續(xù)多個廠家委托該類品種的脂質(zhì)研究，均順利完成。

膽固醇圖譜

脂肪酸圖譜

磷脂和甘油三酯圖譜

典型案例四：布立西坦口服溶液質(zhì)量研究

● 項目名稱

山東省某大型藥企布立西坦口服溶液液質(zhì)量研究

● 項目難點

（1）各國藥典均無收錄。

（2）異構(gòu)體分離難度大。

（3）輔料多且雜，干擾雜質(zhì)出峰。

● 解決途徑及效果

       各國藥典中均無收錄此藥品，原料中異構(gòu)體方法為正相方法。經(jīng)過大量實驗篩選了一款可在反相條件下分離主成分和三個異構(gòu)體的色譜柱，后與C18色譜柱串聯(lián)的方式，解決了在單一異構(gòu)體色譜柱中輔料對異構(gòu)體干擾的問題。經(jīng)過優(yōu)化后的方法，輔料對異構(gòu)體無干擾，異構(gòu)體間的分離度也達到標(biāo)準(zhǔn)。

典型案例五：硝普鈉注射液質(zhì)量研究

● 項目名稱

山東省某大型藥企硝普鈉注射液質(zhì)量研究

● 項目難點

（1）小試樣品pH偏大，超出限度范圍。

（2）氰化物空白干擾較大，進樣重復(fù)性差，回收率偏高。

● 解決途徑及效果

       考察中試樣品及其影響因素樣品的pH結(jié)果均符合規(guī)定，排查出是小試樣品pH偏大的原因。同時考察出檢測時多種因素均影響pH結(jié)果，通過確定關(guān)鍵操作條件最終制定出耐用性良好的pH檢測方法。

       氰化物的測定采用氣相色譜法，需要衍生化，溶劑品牌、衍生劑用量、頂空瓶體積、溶液加入體積、加入順序、頂空溫度等多種因素均影響方法重復(fù)性及空白溶劑干擾較大，通過考察衍生劑用量、頂空瓶體積等，解決了以上兩個問題。

典型案例六：乳酸環(huán)丙沙星氯化鈉注射液質(zhì)量研究

● 項目名稱

         山東省某大型藥企乳酸環(huán)丙沙星氯化鈉注射液質(zhì)量研究

● 項目難點

（1）分子中含有羧基及氨基，極性較大。

（2）藥典雜質(zhì)I與主成分基線分離困難。

（3）其他雜質(zhì)拖尾嚴重。

● 解決途徑及效果

       藥典方法中有關(guān)物質(zhì)主峰拖尾嚴重，且與雜質(zhì)I不能進行基線分離，通過對分子結(jié)構(gòu)研究分析，磷酸三乙胺體系對主物質(zhì)有較好的峰型校正作用，通過調(diào)節(jié)流動相添加劑優(yōu)化色譜條件，實現(xiàn)了主峰與雜質(zhì)I的有效分離，解決了主峰拖尾及雜質(zhì)峰型差的問題，同時提高雜質(zhì)響應(yīng)；經(jīng)過優(yōu)化后的方法，主峰及各雜質(zhì)拖尾因子達到藥典標(biāo)準(zhǔn)。

典型案例七：磷酸川芎嗪原料藥質(zhì)量研究

● 項目名稱

        河南省某大型藥企磷酸川芎嗪原料藥質(zhì)量研究

● 項目難點

（1）只有中國藥典有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

（2）藥典雜質(zhì)I僅用于系統(tǒng)適用性，沒有其他定入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的特定雜質(zhì)。

（3）需要對其進行雜質(zhì)譜分析。

● 解決途徑及效果

       通過對磷酸川芎嗪雜質(zhì)譜及藥企合成工藝分析，確定了4個工藝雜質(zhì)，三個基因毒性雜質(zhì)，有關(guān)物質(zhì)藥典分析方法各雜質(zhì)峰型差，在對分析方法優(yōu)化后得到滿意的分析條件。

典型案例八：恩替卡韋原料藥質(zhì)量研究

● 項目名稱

        山東省某大型藥企恩替卡韋原料藥質(zhì)量研究

● 項目難點

（1）恩替卡韋含有多個羥基及氨基，主峰峰型易于拖尾、前延。

（2）恩替卡韋有三個手性碳。

（3）項目時間緊，同時開發(fā)有關(guān)物質(zhì)及手性異構(gòu)體時間不夠。

● 解決途徑及效果

       通過對恩替卡韋分子結(jié)構(gòu)分析確認，分子局部極性較大，由于分子左右兩側(cè)極性對稱性較好，導(dǎo)致極性部分消除，有利于色譜條件的優(yōu)化。羥基及氨基產(chǎn)生的極性，分別會引起峰型前延及拖尾，在篩選了合適的色譜柱之后，采用純化水、乙腈進行梯度洗脫得到了完美的色譜圖。針對于異構(gòu)體，因空間結(jié)構(gòu)夠大，分子中間的手性在進行空間翻轉(zhuǎn)時，左旋與右旋產(chǎn)生的極性不同，因此較易分開；另外兩個手性由于末端帶有羥基，羥基在跟色譜柱上的羥基作用后會產(chǎn)生各自手性極性的差異化，因此異構(gòu)體也得以分離。

典型案例九：普拉曲沙原料藥質(zhì)量研究

● 項目名稱

        山東省某大型藥企普拉曲沙原料藥質(zhì)量研究

● 項目難點

（1）手性分離。

（2）羧基及氨基對傳統(tǒng)手性柱破壞較大。

● 解決途徑及效果

       通過對普拉曲沙分子結(jié)構(gòu)分析確認，分子結(jié)構(gòu)中含有多個羧基及氨基，用常規(guī)手性色譜柱拆分，柱子的壽命會變差，成本高，最終決定用改變流動相添加劑來進行手性分離，前后分別用氨基柱跟C18柱，發(fā)現(xiàn)用C18柱在添加β環(huán)糊精后能夠有效分離異構(gòu)體，色譜條件經(jīng)過優(yōu)化得到穩(wěn)定的異構(gòu)體檢測條件，大大降低了檢測成本。